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液相色譜儀進樣方式

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液相色譜儀進樣方式
 

液相色譜儀的進樣裝置要求密封性好,死體積小,重復性好,保證中心進樣,進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力和流量影響小。HPLC進樣方式有隔膜進樣、停流進樣、閥進樣和自動進樣器進樣等。

一、隔膜進樣:

        用微量注射器將樣品注入專門設計的與HPLC色譜柱相連的進樣頭內(nèi),可把樣品直接送到色譜柱填充床的中心,死體積幾乎等于零,可獲得*柱效,且價格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPa以上);隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應,使進樣重復性只能達到1%2%;能耐各種溶劑的橡皮不易找到,常規(guī)分析使用受到限制。

二、停流進樣:

        可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新啟動時往往會出現(xiàn)鬼峰;保留時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中,效果較好。

三、閥進樣:

        HPLC分析常用六通閥,其關(guān)鍵部件由圓形密封墊(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在,柱效低于隔膜進樣(約下降5%10%),但耐高壓(3540MPa),進樣量準確,重復性好(0.5%),操作方便。

  1、六通閥進樣方式:

1)部分裝液法進樣:

        進樣時,進樣量應不大于定量環(huán)體積的50%(zui多75%),要求每次進樣體積準確、相同。

        此法進樣的準確度和重復性決定于注射器取樣的熟練程度,而且易產(chǎn)生由進樣引起的峰展寬。

2)*裝液法進樣:

        進樣時,進樣量應不小于定量環(huán)體積的510 倍(zui少3倍),這樣才能*置換定量環(huán)內(nèi)的流動相,消除管壁效應,確保進樣的準確度和重復性。

  2、六通閥使用和維護注意事項:

1)樣品溶液進樣前必須用0.45μm濾膜過濾,以減少微粒對進樣閥的磨損。

2)轉(zhuǎn)動閥芯時不能太慢,更不能停留在中間位置。否則流動相受阻,使泵內(nèi)壓力劇增,甚至超過泵的zui大壓力,再轉(zhuǎn)到進樣位時,過高的壓力將使色譜柱損壞。

3)為防止緩沖鹽和樣品殘留在進樣閥中,每次分析結(jié)束后應沖洗進樣閥。通??捎盟疀_洗,或先用能溶解樣品的溶劑沖洗,再用水沖洗。

四、自動進樣器進樣:

        用于大量樣品的常規(guī)分析。

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